氨基酸測定儀是一種用于分析和測量樣品中氨基酸含量的儀器。其工作原理基于氨基酸的特性以及化學(xué)反應原理。
氨基酸是構成蛋白質(zhì)的基本組成單元,其分子結構包含一個(gè)氨基基團(NH2)和一個(gè)羧基(COOH),以及與中央碳原子連接的側鏈。氨基酸的種類(lèi)很多,每種氨基酸的側鏈結構各不相同,這決定了它們在化學(xué)性質(zhì)上的差異。
氨基酸測定儀主要基于以下兩種方法進(jìn)行氨基酸的測定:色譜法和光度法。
1、色譜法:
(1)樣品準備:首先,將待測樣品進(jìn)行處理,通常需要將樣品中的蛋白質(zhì)轉化為氨基酸。這可以通過(guò)酸水解或酶催化反應來(lái)實(shí)現。
(2)色譜分離:處理后的樣品被注入到氨基酸分析柱中,其中氨基酸分離根據不同的物理性質(zhì)進(jìn)行。常見(jiàn)的方法是離子交換色譜和高效液相色譜(HPLC)。在這些色譜柱中,氨基酸根據側鏈的性質(zhì)以不同速度通過(guò),從而實(shí)現分離。
(3)檢測:分離出的氨基酸在檢測器中被定量檢測。常用的檢測方法有紫外光譜法(UV)和熒光檢測法。這些方法利用氨基酸結構上特定的吸收或發(fā)射特性來(lái)確定其濃度。

2、光度法:
(1)反應原理:常用的反應是二氨基萘-2-磺酸(DNS)法。該方法基于氨基酸與DNS試劑之間的反應。在堿性條件下,DNS試劑會(huì )與氨基酸中的羧基和氨基發(fā)生反應,生成帶有強吸收的產(chǎn)物。這種產(chǎn)物的濃度與樣品中的氨基酸含量成正比。
(2)測定步驟:樣品先經(jīng)過(guò)蛋白質(zhì)水解處理,然后與DNS試劑混合,在高溫條件下進(jìn)行反應。反應完成后,通過(guò)光度計測量產(chǎn)物的吸光度,并與標準曲線(xiàn)相比較,從而確定樣品中氨基酸的含量。
總結起來(lái),氨基酸測定儀的工作原理基于氨基酸的特性以及不同化學(xué)反應的原理。通過(guò)有效的樣品處理、分離和檢測方法,可以準確測量樣品中氨基酸的含量,從而對生化研究、食品分析、臨床診斷等領(lǐng)域提供重要的信息和數據。